METODE EKSTRAKSI ALGINAT

TUGAS BIOTEKNOLOGI HASIL PERIKANAN

“METODE EKSTAKSI ALGINAT DARI BEBERAPA LITERATUR”

OLEH :

CHENDRYANA R HULISELAN

2010-67-003

THP

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

UNIVERSITAS PATTIMURA

AMBON

2013

METODE EKSTRAKSI ALGINAT

      MENURUT GUNTUR DIANTORO

Alat dan bahan :

·         Gunting Untuk memeotong sargassum

·         Timbangan Untuk menimbang jumlah sargassum yang akan digunakan

·         Beker glass Meletakan sargassum saat di beri perlakuan

·         Pengaduk Untuk mengaduk sargassum saat di panaskan

·         Kasa Untuk menyaring sargassum

·         Aluminium foil Sebagai tempat meletakan sargassum saat di keringkan

·         Tabung ukur Untuk mengukur volume larutan

·         Kompor pemanas Untuk memanaskan sargassum

·         Pipet Untuk mengambil lerutan HCl dan NaOH

·         Sargassum Sp Sebagai sample yang akan di ekstraksi

·         HCl Untuk membersihkan kotoran pada sargassum

·         NaOH Untuk menetralkan pH

·         Na2CO3 Untuk mengikat alginate

·         NaOCl Untuk memutihkan sample

·         Butanol Untuk mengendapkan alginat

Cara Kerja :

1.      Mengeringkan rumput laut sargassum sp, lalu timbang 50 gr

2.      Memotong dengan ukuran 0,5-0,1 cm

3.      Merendam dengan larutan HCl 0,5 % pada suhu 50 C selama 10 menit, kemudian saring dan cuci

4.      Merendam dengan larutan NaOH 1% pada suhu 50 C selama 10 menit, kemudian saring dan cuci

5.      Melakukan ekstraksi dengan Na2CO3 4% Pada suhu 50 C selama 30 Menit. Kemudian saring (Na2CO3 Untuk mengikat alginate)

6.      Menambahkan NaOCl 12 % ke dalam filtrate, dinginkan pada suhu 10 C (NaOCl Untuk memutihkan sample)

7.      Mengasamkan dengan HCl pekat sampai pH=3, Kemudian saring dan angina-anginkan asam alginate yang diperoleh (HCl Untuk membersihkan kotoran pada sargassum)

8.      Menambahkan larutan NaOH 0,1 N sampai pH=7 (NaOH Untuk menetralkan PH)

9.      Mengendapkan dengan Butanol

10.  Menyaring endapan sodium alginate yang terjadi, kemudian keringkan di bawah sinar matahari selama 7 hari

11.  Menimbang sodium alginate yang di peroleh

Menghitung kadar alginate dalam sargassum Sp

      MENURUT RINA ANDRIYANI

A. Materi

Alat-alat yang digunakan dalam praktikum ekstraksi alginat adalah pH meter, timbangan digital, oven, tabung ukur, ember,hot plate,kain kasa/saringan 100 mesh, bejana, freezer, dan blender. Bahan yang digunakan adalah rumput laut Sargassum polycystum, KOH 2 %, NaCO₃7 %,NaOH 0,5 %, NaOH 10 %, HCl 5 %, H₂O₂ 6 %, alkohol 95 %.

B. Metode

Tahapan cara kerjanya adalah:

1.    Persiapan

Rumput laut yang digunakan adalah Sargassum polycystum.Rumput laut yang kering ditimbang seberat 60 gram.

2.    Perendaman

Rumput laut kering dicuci dengan air bersih dan dilakukan perendaman.Perendaman rumput laut dilakukan tiga kali.Pertama, rumput laut direndam dalam larutan KOH 2 % selama 30 menit. Kedua, NaOH 0,5 % selama 30 menit dengan perbandingan 10:1. Ketiga, rumput laut direndam dalam larutan HCl 0,5 % selama 30 menit dengan perbandingan 10:1 lalu dicuci dengan air mengalir selama 5 menit.

3.    EkstraksI

Dilakukan dengan menambahkan larutan Na₂CO₃7 % kedalam larutan dengan perbandingan 10:1 dan dipanaskan pada suhu 50^oC dengan ekstraksi selama 7 jam.

4.    Penyaringan

Hasil yang didapat kemudian disaring dengan kain kassa ukuran 100 mesh.

5.    Pengasaman

Larutan hasil penyaringan kemudian diasamkan dengan menambahkan HCl 5 % hingga memperoleh pH 2,8-3,2 selama 5 jam.

6.    Pemucatan

Pemucatan dilakukan selama 1 jam dengan menambahkan H₂O₂ 6 % dengan perbandingan 1:1 ke dalam larutan.

7.    Pengedapan

Tahap ini dilakukan dengan menambahkan NaOH 10 % hingga mencapai pH 8,5-9,0. Perlakuan ini dilakukan selama 5 jam. Melalui proses ini dihasilkan larutan garam alginat dan air.

8.    Pemurnian.

Garam alginat yang terdapat dalam larutan dimurnikan dengan menambahkan alkohol 95 % dengan perbandingan 1:1.

9.    Pengeringan

Hasil tersebut dihasilkan dijemur dibawah sinar matahari atau didalam oven dengan suhu 60^oCselama 3-5 hari kemudian digiling atau diblender.

10.  Analisis Hasil

Garam aginat yang didapat kemudian dihitung rendemen. Adapun kandungan rendemen alginat dapat dihitung dengan menggunakan metode yang dilaporkan oleh Colloids dalam Sarjana dan widia (1998) dengan rumus:

Rendemen alginat = x 100 %

Diagram Alir Pembuatan Alginat

Rumput laut Sargassum polycystum

Perendaman, KOH2 % selama 30 menit, rasio (1:1)

Dicuci dengan air mengalir selam 5 menit

Perendaman, NaOH 0,5 %, 30 menit, rasio (10:1)

Perendaman, HCl 0,5 %, 30 menit, rasio ( 10:1 )

Ekstraksi, Na₂CO₃ 5 %, 2 jam, suhu 50^oC, rasio (10:1)

Penyaringan

Pengasaman, HCl 5% (pH 2,8-3,2 ) selama 5 jam

Pemucatan, H₂O₂ 6 %, rasio ( 1:1 ) selama 1 jam

Pengendapan, NaOH 10 % ( pH 8,5-9,0 ) selama 5 jam

Pemurnian, alkohol 95 %, rasio ( 1:1 )

Pengeringan, dijemur atau di oven ( 60⁰C ) selama 3-5 hari

      MENURUT ABDULLAH RASYID

Bahan Penelitian

Sampel  alga  coklat  yang  digunakan  dalam  penelitian  adalah  Sargassum  echinocarphum. Bahan kimia yang digunakan dalam penelitian ini terdiri dari : asam klorida,  natrium  karbonat,  hidrogen  peroksida,  isopropanol,  natrium  hidroksida, celite dan kalsium klorida.

Metode ekstraksi dan pengukuran kadar

Metode  ekstraksi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  merupakan  hasil pengembangan  dari  beberapa  metode  yang  telah  dilaksanakan  di  laboratorium Produk  Alam  Laut  -  LIPI  (RASYID  &  RACHMAT  2002).  Secara  umum  tahapan prosedur  ekstraksi  natrium  alginat  yang  dilakukan  adalah  sebagai  berikut  :  sampel alga  coklat  (Sargassum  echinocarphum)  yang  dikumpulkan  dari  lokasi  penelitian dicuci sampai bersih dengan air tawar, kemudian dikeringkan dengan sinar matahari langsung.

Sampel  dihaluskan  dengan  menggunakan  blender,  kemudian    ditimbang sebanyak  50  gram.  Sampel  dicuci  dengan  larutan  asam  klorida  5%  untuk menghilangkan  sisa-sisa  kotoran  yang  masih  menempel  sehingga  mempermudah proses  pembentukan  asam  alginat,  kemudian  dicuci  dengan  aquades  untuk menghilangkan sisa asam. Ke dalam sampel yang sudah dicuci ditambahkan larutan natrium  karbonat  4%  untuk  pembentukan  natrium  alginat  sambil  diaduk  sampai menjadi  pasta.  Pasta  yang  terbentuk  diencerkan  dengan  aquades  sambil  diaduk kemudian  disaring. Selanjutnya dipucatkan  dengan menambahkan  larutan  hidrogen peroksida 25% ke dalam filtrat dan  kemudian  ditambahkan larutan kalsium  klorida 5% sehingga  terbentuk endapan berwarna putih. Ke  dalam endapan yang terbentuk ditambahkan larutan asam klorida 5%. Asam alginat yang terbentuk ditandai dengan timbulnya  gumpalan  di  bagian  atas  cairan.  Setelah  disaring,  residu  yang  diperoleh ditambah  dengan  larutan  natrium  hidroksida  10%.  Untuk  proses  pemurnian  dan memudahkan  penyaringan,  ke  dalam  campuran  ditambahkan  isopropanol  95%. Endapan  bersama  kertas  saring  yang  telah  diketahui  bobotnya  dikeringkan  dalam oven suhu 60 oC. Endapan yang telah kering ditimbang bersama kertas saring untuk penentuan  kadar  natrium  alginat.  Prosedur  di  atas  dilakukan  sebanyak  tiga  kali ulangan.

Hasil  yang  diperoleh  adalah  natrium  alginat,  selanjutnya  dihaluskan  dan dianalisis kadar natrium alginat, kadar air  dan nilai viskositasnya. Penetapan kadar air natrium alginat menggunakan metode AOAC (1995). Pengukuran nilai viskositas natrium  alginat  dilakukan  dengan  menggunakan  Brookfield  viscometer  No.  M/85-150-C dengan konsentrasi larutan 2% pada temperatur 25^OC.

      MENURUT TRI SUSANTO

Sargassum filipendula

(utuh, ujung, pangkal, daun)

↓

Perendaman, HCl 0,5 %, 30 menit

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

Perendaman, NaOH 0,5 %, 30 menit

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

Ekstraksi dengan Na2CO3 7,5 %

(ratio 10 : 1, suhu 50o C, selama 1 jam, 1,5 jam dan 2jam)

↓

Penghancuran (diblender 5 menit)

↓

                             Penyaringan                   residu

↓

Filtrat

↓

Pengasaman ( pH 2,8), 5 jam

HCl 5 %,

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

Pemucatan

CaOCl2 , 1 %

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

Pengendapan (pH 10,2 ), 5 jam

NaOH 10 % ,

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

                             Sentrifuge 5 menit                   cairan

↓

Endapan

↓

Penambahan Isopropanol 95 %

↓

Pengeringan ± 50

o

C, 17 jam

↓

Garam Alginat --δ Analisa :

- Rendemen

- Viskositas

- Kadar Air

Diagram alir penelitian Tahap I :

Pengaruh bagian  Sargassum dan lama ekstraksi terhadap garam alginat

Ekstraksi dan Pemurnian Alginat

(Tri Susanto)

Sargassum filipendula

(basah , kering)

↓

Perendaman, HCl 0,5 %, 30 menit

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

Perendaman, NaOH 0,5 %, 30 menit

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

Ekstraksi dengan Na2CO3 7,5 %

(ratio 10 : 1, suhu 50o C, selama 1 jam, 1,5 jam dan 2jam)

↓

Penghancuran (diblender 5 menit)

↓

                             Penyaringan                  residu

↓

Filtrat

↓

Pengasaman ( pH 2,8), 5 jam

HCl 5 %,

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

Pemucatan

CaOCl2 , 1 %

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

Pengendapan (pH 10,2 ), 5 jam

NaOH 10 % ,

(ratio 10 : 1, v/w)

↓

                      Sentrifuge 5 menit                   cairan

↓

Endapan

↓

Penambahan Isopropanol 85%, 90% dan 95 %

↓

Pengeringan ± 50

o

C, 17 jam

↓

Garam Alginat --δ Analisa :

-  Rendemen – Viskositas – Kadar air – Kadar abu

-  Uji gugus fungsional – Kadar kemurnian asam alginat

-  Analisa Logam  Pb & Hg

Diagram alir penelitian Tahap II :

Pengaruh kondisi bahan baku dan konsentrasi isopropanol terhadap kualitas garam alginat

      MENURUT MARITA AGUSTA MAHARANI DAN RIZKI WIDYAYANTI

Menurut Maharani dan Widyayanti membuat alginat dengan beberapa perlakuan/ metode yang berbeda, tetapi tahap yang pada dasarnya sama

      MENURUT  WAHYU MUSHOLLAENI DAN ENDANG RUSDIANA

Ekstraksi Na-Alginta

                Metode ekstraksi Na-Alginat. Alginofit dibersihkan dari kotoran yang melekat, dipotong ± 1 cm, dicuci dan dikeringkan dengan sinar matahari selama 2-3 hari hingga kadar airnya ± 13,5%. Leaching I dilakukan dengan CaCl₂ 1% selama 30 menit dan dicuci. Leaching II dengan HCl 5% selama 30 menit pada suhu 30-40°C dan dicuci. Setelah itu, ditambahkan larutan KOH 0,5% selama 60 menit pada suhu 50-60°C selama 1 jam dan disaring . fitrat yang diperoleh, dipucatkan dengan NaOCL 10%, diaduk dan dibiarkan selama 5 jam. Pengendapan dengan HCL 5% dilakukan sampai terbentuk endapan dalam bentuk asam alginta, dicuci dan disaring. Setelah itu, dinetralkan dengan Na₂CO₃ 10% pada pH 6-7, diaduk dan disaring. Pemurnian dilakukan dengan isopropanol 95% dan dikeringkan pada suhu 50-60°C selama 17 jam, kemudian digiling hingga didapatkan tepung natrium alginat.

      MENURUT RACHMAT KOSMAN

Sampel  Sargassum  duplicatum  J.G Agardh, Turbinaria decurrens (Bory), dan T. ornata (Turner)  J.Argardh  yang  telah  diolah  direndam dengan  formaldehida  10  –  40  %  selama  2  jam, kemudian diekstraksi dengan Na₂CO₃ dengan konsentrasi  10  %,  12  %,  dan  14  %  pada  suhu  70  °C sehingga  terbentuk  ekstrak  kasar  natrium  alginat yang  akan  diendapkan  dengan  CaCI2  15  %  untuk mendapatkan  kalsium  alginat.  Sediaan  disaring dan dicuci hingga bersih. Endapan kalsium alginat ini  ditambahkan  dengan  HCI  0,5  %  untuk  menda-patkan asam alginat yang kemudian ditambah de-ngan Na₂CO₃  10 %, 12 %, dan 14 % yang bersifat basa  untuk  dapat  menghasilkan  natrium  alginat. Setelah itu dikeringkan dalam oven dan di-analisis. Hasil  yang  berupa  serbuk  putih  gading  kemudian diuji dengan menggunakan spektrofotometer infra-merah.

DAFTAR PUSTAKA

Andriyani Rina. 2011. Ekstraksi Alginat. Fakultas Biologi, Universitas Jendral Soedirman; Purwekerto. dalam http://erinandry.blogspot.com/2011/05/ekstraksi-alginat.html

Diantoro Guntur. 2010. Laporan Biokimia Ekstraksi Alginat. FPIK, UNDIP; Semarang. dalam http://youngmangrover.blogspot.com/2010/06/laporan-biokimia-ekstraksi-alginat.html

Kosman Rachmat. PEMURNIAN NATRIUM ALGINAT  DARI Sargassum duplicatum J.G. Agardh, Turbinaria decurrens (Bory)  DAN Turbinaria ornata (Turner) J. Argardh  ASAL PERAIRAN TERNATE, MALUKU UTARA. Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia

Maharani M. A dan Widyayanti Rizki. PEMBUATAN ALGINAT DARI RUMPUT LAUT UNTUK MENGHASILKAN PRODUK DENGAN RENDEMEN DAN VISKOSITAS TINGGI. Fakultas Teknik, Universitas Diponegoro. Semarang

Mushollaeni Wahyu dan Rusdiana Endang. 2011. Karakterisasi Natrium Alginat dari Sargassum sp., Turbinaria sp. dan Padina sp. Jurnal Teknologi dan Industri Pangan, Vol XXII No. 1 Th. 2011.

Rasyid Abdullah. 2010. EKSTRAKSI NATRIUM ALGINAT DARI ALGA COKLAT  Sargassum echinocarphum. Oseanologi dan Limnologi di Indonesia (2010) 36(3): 393-400.

Susanto Tri, Zailanie Kartini, dan BW Simon. 2001. EKSTRAKSI DAN PEMURNIAN ALGINAT DARI Sargassum filipendula  - KAJIAN DARI BAGIAN TANAMAN, LAMA EKSTRAKSI DAN  KONSENTRASI ISOPROPANOL. JURNAL TEKNOLOGI PERTANIAN, VOL. 2, NO. 1, APRIL 2001 : 10-27